Spezifische Schritte zur Extraktion von Chlorophyll durch Zellfragmentierung mit einem Ultraschall-Zellbrecher

Der Ultraschall-Zellzerkleinerer nutzt den Dispersionseffekt von Ultraschall in einer Flüssigkeit, um Kavitation zu erzeugen und dadurch feste Partikel oder Zellgewebe in der Flüssigkeit aufzubrechen.
Die Entwicklung der biologischen Industrie hat die Anforderungen an Experimente mit Ultraschall-Zellpulverisierern erhöht, wie z. B. die Messung und Steuerung der Probentemperatur, die Verbesserung des Intelligenzniveaus der Tieftemperatur-Kühlproben und der gesamten Maschine usw.
Die spezifischen Schritte zur Extraktion von Chlorophyll durch Ultraschall-Zellzerkleinerung mit einem Ultraschall-Zellbrecher:
1. Zentrifugieren oder filtern Sie die Wasserprobe und installieren Sie eine Acetatfaser-Filtermembran auf dem Saugfilter. Gießen Sie eine quantitative Menge Wasserprobe zur Filtration ein. Der Unterdruck während der Filtration sollte nicht zu hoch sein (ca. 50 kPa). Nachdem die Wasserprobe entnommen wurde, ziehen Sie noch 1-2 Minuten lang weiter, um die Feuchtigkeit auf der Filtermembran zu reduzieren. Wenn eine kurzfristige Lagerung für 1-2 Tage erforderlich ist, kann es zum Einfrieren in einem normalen Kühlschrank aufbewahrt werden. Wenn eine Langzeitlagerung (30 Tage) erforderlich ist, sollte es in einem Kühlschrank mit niedriger Temperatur (-20 Grad) gelagert werden.
2. Nehmen Sie die Filtermembran mit Phytoplankton heraus und trocknen Sie sie 6-8 Stunden lang bei niedriger Temperatur im Kühlschrank. Schneiden Sie es mit einer Schere in kleine Stücke und geben Sie es in ein 5-ml- oder 10-ml-Zentrifugenröhrchen. Fügen Sie 3-4 ml 90 %iges Aceton hinzu, um die Fragmente unter den Flüssigkeitsspiegel zu tauchen. Legen Sie die Fragmente in einen Ultraschallbehälter und verwenden Sie Ultraschallwellen, um die Zellen der Probe aufzubrechen. (Vergleich von Experimenten zu unterschiedlichen Zeiten und Häufigkeiten, um die * Identifizierung der Fragmentierungszeit und -häufigkeit für einheitliche Methoden zu erleichtern).
3. Zentrifugieren Sie die Probe, die einer Zellfragmentierung mit Ultraschall unterzogen wurde, 10 Minuten lang in einer Zentrifuge (3000-4000 U/min). Gießen Sie den Überstand in einen 5-ml- oder 10-ml-Messkolben. Mit 90 % Aceton auf 5 ml oder 10 ml verdünnen und gut schütteln.
4. Legen Sie den Überstand auf ein Spektrophotometer und verwenden Sie eine kolorimetrische Schale mit 1 cm Lichtweg, um die Absorptionswerte bei Wellenlängen von 750 nm, 663 nm, 645 nm bzw. 630 nm abzulesen. Verwenden Sie 90 % Aceton als Blindwert-Absorptionsmessung, um die Absorption der Probe zu korrigieren.